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Les oligosgRNA simples pour CRISPR nécessitent-ils un CAS9 modifié ?

Les oligosgRNA simples pour CRISPR nécessitent-ils un CAS9 modifié ?


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J'essaie d'utiliser CRISPR pour insérer une étiquette dans un gène. La façon dont nous l'avons fait dans le passé consiste à utiliser séparément un ARNcr (avec une séquence pour interagir avec le tracr) et la séquence universelle du Tracr. Celui-ci est ensuite injecté avec une protéine Cas-9 isolée et une matrice de réparation. Ma question est la suivante: peut-on utiliser un seul oligo sgRNA (crRNA + tout le Tracr) de manière interchangeable, ou avez-vous besoin d'un Cas9 modifié pour accepter le seul oligo version gRNA.


Voir la vidéo: Designing gRNA Oligos to Clone into Cas9 Expression Plasmids for KO Experiments (Décembre 2022).